JoVE Encyclopedia of Experiments
Neurociencia
0 vistas • 2:59 min • August 29th, 2025
Asegure un mouse anestesiado después del accidente cerebrovascular en un marco estereotáxico.
Vuelva a abrir la incisión del cuero cabelludo y limpie el cráneo expuesto con algodón empapado en solución salina.
Identifique el núcleo necrótico blanco-amarillo en el tejido cerebral y un orificio de rebaba que confirma el sitio del accidente cerebrovascular.
Este núcleo necrótico contiene neuronas dañadas y vasculatura no funcional.
Conecte una jeringa cargada de partículas de hidrogel microporoso a la bomba y establezca las coordenadas de inyección.
Baje la jeringa por encima del orificio de la rebaba, luego insértela en el sitio del trazo.
Inyecte el hidrogel a una velocidad de flujo controlada para garantizar una difusión gradual sin dañar el tejido cerebral.
Incubar para permitir que el hidrogel se reticula, formando un andamio de biomaterial.
Retraiga lentamente la jeringa, asegurando la retención de hidrogel sin fugas.
Cierre la incisión con pegamento quirúrgico y devuelva el ratón a su jaula.
El andamio de hidrogel imita la matriz extracelular, induciendo la infiltración celular y la formación de nuevos vasos sanguíneos, lo que indica el potencial del hidrogel en neuroterapia.
Vuelva a abrir la incisión sobre el cerebro y use algodón empapado en solución salina para limpiar cualquier residuo del cráneo.
Se verá un círculo de tejido blanco y amarillo y el orificio de la fresa. Bloquee la bomba de inyección a 90 grados sobre el mouse.
Cargue la jeringa en la bomba y mueva la bomba y las direcciones X e Y para orientar la jeringa sobre el orificio de la rebaba. Mueva la bomba en la dirección Z hasta que la aguja toque la parte superior del orificio.
Y reinicie la Z en la consola de visualización digital. Mueva la jeringa 0,75 milímetros en la dirección Z y presione start en la consola de la bomba para inyectar de cuatro a seis microlitros del hidrogel a un caudal de un microlitro por minuto. Cuando se haya administrado todo el hidrogel, configure un temporizador de cinco minutos para permitir que el gel comience a reticularse.
Después de cinco minutos, gire la perilla Z para tirar lentamente de la jeringa. Cuando la aguja esté lo suficientemente lejos del cráneo, desbloquee y retire la bomba. Luego cierre la piel sobre el cráneo y coloque al ratón en una jaula limpia con monitoreo hasta que se haya recuperado de la anestesia.