Implantación de cánula en la cisterna magna en un modelo de ratón

Comience con un ratón anestesiado colocado en un marco estereotáxico, con la cabeza inclinada hacia abajo para permitir un acceso más fácil a la cisterna magna, un espacio lleno de líquido cefalorraquídeo o LCR.

Una incisión en la línea media del cuero cabelludo expone la cisterna magna, que aparece como un triángulo invertido entre el cerebelo y la médula, cubierto por la membrana dural.

Use un hisopo de algodón para limpiar el exceso de líquido de la duramadre.

Con unas pinzas, agarre una cánula cerca de la parte de la aguja.

Inserte la aguja en ángulo a través de la duramadre en el centro de la cisterna magna, evitando la penetración en el cerebelo y la médula.

Limpie cualquier LCR filtrado.

Aplique adhesivo a la duramadre para asegurar la cánula, luego agregue un acelerador de pegamento para una adhesión inmediata.

Cubra la incisión con una mezcla de cemento y adhesivo, seguida de un acelerador de pegamento.

El ratón canulado intracisternal está listo para la administración dirigida de agentes terapéuticos en LCR.

Fije el ratón en el marco estereotáxico, haciendo uso del arco intraneural o del arco cigomático. Luego, incline ligeramente la cabeza para que forme un ángulo de 120 grados con respecto al cuerpo.

A continuación, aplique ungüento oftálmico y vuelva a aplicarlo según sea necesario durante la cirugía. Encuentre la cresta occipital, que es la parte del cráneo que sobresale inmediatamente por encima de los músculos del cuello. Levante la piel suprayacente con unas pinzas y corte un trozo de piel en forma de almendra de aproximadamente un centímetro a lo largo de la línea media.

Luego, usando la cresta occipital como punto de referencia, separe el tejido conectivo superficial para exponer los músculos del cuello debajo. Use hisopos de algodón o lanzas oculares para controlar cualquier sangrado resultante. Para continuar, separe los músculos en la línea media pasando con cuidado las pinzas por el medio del sitio de la incisión en el eje anterior a posterior.

Luego, con un par de pinzas curvas en cada mano, une las puntas en el medio cerca de la parte inferior del cráneo y aparta los músculos para exponer la cisterna magna. La cisterna magna parece un pequeño triángulo invertido, delineado por el cerebelo arriba y la médula debajo. Con una lanza quirúrgica o un hisopo de algodón, limpie la membrana dural que cubre el CM. A continuación, con pinzas curvas en la mano dominante, agarre la cánula cerca de la aguja cubierta por el tubo.

Luego, coloque el dedo medio de la otra mano en la barra del oído para crear un apoyo estable para la cánula. Ahora, en el centro del CM, perfore la duramadre a 45 grados en relación con la cabeza del ratón. Solo inserte la aguja donde el bisel está debajo de la duramadre para evitar penetrar en el cerebelo o la médula.

Si es necesario, limpie cualquier líquido cefalorraquídeo filtrado con una lanza o un hisopo. Luego, aplique unas gotas de cianoacrilato en la membrana dural que rodea la cánula y agregue una gota de acelerador de pegamento para curar el pegamento inmediatamente. A continuación, combine cemento dental y pegamento de cianoacrilato.

Luego, cubra todo el sitio de la incisión y aplique rápidamente una gota de acelerador de pegamento para curar.