Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:12 min. • August 29th, 2025
Tome un cultivo de Staphylococcus aureus, una bacteria con una pared celular gruesa de peptidoglicano.
Diluya el cultivo en medios frescos que contengan antibióticos e incube a una temperatura cálida agitando para promover el crecimiento bacteriano.
Transfiera el cultivo a un tubo y centríquelo para granular las bacterias.
Deseche el sobrenadante y coloque el gránulo en hielo para proteger las bacterias del daño.
Vuelva a suspender el gránulo en tampón de lisis y transfiéralo a un tubo que contenga perlas de sílice.
Inserte el tubo en un instrumento mecánico de lisis celular e inicie la agitación.
Las colisiones rápidas entre las bacterias y las perlas generan fuerzas de cizallamiento. Esto lisa las bacterias, liberando ADN, ARN y complejos ARN-proteína.
Los iones en el tampón de lisis estabilizan las estructuras de ARN, mientras que los agentes reductores en el tampón inactivan las enzimas que degradan el ARN.
Ahora, centrifuga la mezcla nuevamente para granular los escombros.
Recolecte el sobrenadante que contiene ácidos nucleicos y proteínas para su posterior análisis.
Cultive una colonia de cepas que transporten pCN51 P3 MS2 sRNA o plásmidos pCN51 P3 MS2 en tres mililitros de medio BHI s
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos