Un método de microdilución en caldo para pruebas de susceptibilidad a antibióticos de bacterias grampositivas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 5:35 min. • August 29th, 2025
Aísle las colonias bacterianas grampositivas de una placa de cultivo y suspenderlas en un medio.
Diluya la suspensión para lograr la concentración bacteriana óptima para el ensayo.
Inocular los pocillos de prueba de una microplaca que contenga concentraciones crecientes de un antibiótico lipoglicopéptido y un pocillo de control de crecimiento que contenga solo el medio.
Extienda una alícuota del pocillo de control sobre las placas de cultivo para verificar la pureza del cultivo y el recuento de bacterias.
Incubar para permitir el crecimiento bacteriano, durante el cual se sintetiza la pared celular.
El antibiótico se une al peptidoglicano, un componente de la pared celular, y a sus precursores, inhibiendo la polimerización y debilitando la pared.
La interrupción permite que la presión osmótica provoque la lisis celular.
Después de la incubación, confirme la pureza del cultivo y el recuento bacteriano óptimo.
Inspeccione los pozos en busca de crecimiento bacteriano.
El pocillo de control muestra un crecimiento visible, mientras que el pocillo de prueba con la concentración de antibióticos más baja que inhibe completamente el crecimiento indica la concentración inhibitoria mínima (CIM).
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