Transinfección bacteriana in vitro de células T mediante la formación de sinapsis inmunológicas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:05 min. • September 26th, 2025
Comience con pocillos que contengan células T CD4+ que expresen receptores específicos del péptido ovoalbúmina u OVAp.
En el pozo de control negativo, coloque un inserto de membrana porosa.
En un tubo, tome células dendríticas infectadas con bacterias y cargadas con OVAp para su presentación superficial.
Agregue células dendríticas directamente en el pocillo de prueba y en el inserto en el pocillo de control negativo.
Agregue medios a los pocillos e incube.
En el pozo de prueba, las células interactúan para formar una sinapsis inmunológica, lo que facilita la transferencia bacteriana de la célula dendrítica a la célula T, un proceso conocido como transinfección.
En el pozo de control negativo, la barrera de membrana impide la interacción célula-célula, inhibiendo así la transinfección.
Agregue el antibiótico gentamicina a los pocillos e incube.
La gentamicina no puede penetrar en las células eucariotas, por lo que solo mata a las bacterias no internalizadas, mientras que las bacterias internalizadas sobreviven.
La muestra de prueba que contiene células T infectadas y la muestra de control con células T no infectadas ahora están listas para el aislamiento de células T y la cuantificación de
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