Seguimiento de la dinámica de la infección bacteriana en un ratón mediante bioluminiscencia
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:35 min. • September 26th, 2025
Comience con una suspensión de una cepa atenuada de una bacteria patógena.
La cepa atenuada muestra una patogenicidad reducida debido a deleciones específicas en genes de virulencia.
Las bacterias están marcadas cromosómicamente con un operón bioluminiscente que permite la producción autónoma de luz.
Las bacterias expresan el operón bioluminiscente, produciendo una enzima luciferasa y un complejo enzimático que sintetiza el sustrato de luciferasa.
La luciferasa oxida el sustrato para producir luz visible.
Centrifugar la suspensión y desechar el sobrenadante.
Lave las células con un tampón, centrifugue nuevamente y deseche el sobrenadante para eliminar los componentes no celulares residuales.
Vuelva a suspender las células en el tampón para lograr una concentración bacteriana óptima y extraiga la suspensión en una jeringa.
Inyecte la suspensión por vía intraperitoneal en un ratón, luego transfiérala a una jaula.
Visualice la señal bioluminiscente a intervalos regulares.
La cepa atenuada permanece localizada y la bioluminiscencia disminuye gradualmente, lo que indica la eliminación de la infección.
En la mañana de las inyecciones, descongele los crioviales de las células bacterianas a cuatro gr
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