Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:36 min. • September 26th, 2025
Comience con un matraz que contenga un manantial y se llene con un medio rico en nutrientes que apoye el ciclo de vida completo de la bacteria Streptomyces venezuelae .
Inocular las esporas bacterianas en el medio e incubar agitando para asegurar una correcta aireación y distribución de nutrientes.
El resorte mejora la mezcla, apoyando un crecimiento uniforme y consistente.
Las esporas absorben nutrientes y germinan, produciendo tubos germinativos que se extienden en sus puntas, se ramifican en hifas y se convierten en una estructura micelial.
A medida que los nutrientes se vuelven limitados, el organismo produce hifas esporógenas especiales que se dividen y producen esporas, células reproductoras latentes.
Observe bajo un microscopio de contraste de fase para confirmar la presencia de fragmentos y esporas de micelio.
Centrifugar el cultivo para granular los desechos miceliales más pesados, dejando esporas más ligeras en el sobrenadante.
Transfiera el sobrenadante a un microtubo y colóquelo en hielo para evitar la germinación prematura.
Diluya la suspensión de esporas en medio fresco y guárdela en condiciones frías hasta su uso posterior.
Inocular 30 mililitros de medio de crecimiento suplementado con 10 microlitros de esporas de la cepa S.venezuela a fotografiar. Para un crecimiento y esporulación constantes de las células, use un matraz deflector o un matraz que contenga un resorte para permitir una aireación suficiente.
Cultive las células durante 35 a 40 horas a 30 grados Celsius y 250 RPM. Cuando esté listo, debería poder ver los fragmentos y esporas de micelio a través de microscopía de contraste de fase montada en líquido. Centrifugar un mililitro del cultivo en una centrífuga de mesa a 400 veces G durante un minuto para granular el micelio y los fragmentos celulares más grandes.
Luego transfiera aproximadamente 300 microlitros del sobrenadante que contiene una suspensión de esporas, a un nuevo tubo de 1,5 milímetros y coloque el tubo sobre hielo.