Imágenes de lapso de tiempo de fluorescencia del ciclo de vida de Streptomyces venezuelae

Tome una placa microfluídica con un pozo que contenga esporas de Streptomyces venezuelae, una bacteria formadora de hifas.

Otros pozos designados contienen medio rico en nutrientes o gastado.

Las esporas se derivan de una cepa que expresa proteínas fluorescentes DivIVA y FtsZ, que se localizan en las puntas de las hifas y las paredes transversales, respectivamente.

Aplique aceite de inmersión a la lente del objetivo de un microscopio invertido y a la ventana de imágenes de la placa.

Monte la placa en la platina del microscopio y comience a tomar imágenes de lapso de tiempo.

Cargue las esporas en la cámara de cultivo de la placa.

Luego, introduce el medio rico en nutrientes para iniciar la germinación de las esporas.

A medida que las hifas crecen, DivIVA se acumula en las puntas de las hifas, mientras que FtsZ forma anillos dispersos en las paredes transversales.

A continuación, cambie al medio gastado. La falta de nutrientes en este medio favorece la esporulación.

En las hifas que brotan, los focos de DivIVA desaparecen y FtsZ se reorganiza en una escalera regular de anillos de división, formando septos de esporulación.

Con el tiempo, la desaparición de la fluorescencia de FtsZ en las mismas