Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:45 min. • September 26th, 2025
Tome chips microfluídicos con cámaras de crecimiento y medicamentos separadas por una válvula micromecánica.
Cargue cepas de E. coli mutantes de tipo salvaje y resistentes a TMP, suspendidas en medios, en las cámaras de crecimiento usando presión, donde Trimethoprim (TMP) es el antibiótico probado.
A continuación, cargue las cámaras de medicamentos con medios que contengan una baja concentración de TMP para inducir estrés celular en las bacterias.
Accione la válvula micromecánica para permitir la difusión de TMP en las cámaras de crecimiento, lo que permite la entrada de TMP en las bacterias.
Coloque los chips dentro de la incubadora montada en la platina del microscopio invertido e inicie imágenes de lapso de tiempo.
En E. coli de tipo salvaje, TMP se une a la enzima dihidrofolato reductasa, evitando la unión de dihidrofolato y causando filamentación inducida por estrés y reducción de la multiplicación bacteriana.
Sin embargo, la estructura DHFR alterada de la cepa mutante evita la unión de TMP, lo que permite la multiplicación normal.
Observe las imágenes de lapso de tiempo.
La E. coli de tipo salvaje exhibe filamentación y multiplicación reducida bajo tratamiento TMP, mientras que la ce
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