Identificación de alto rendimiento de polímeros repelentes de bacterias mediante cribado de microarrays

Coloque un portaobjetos de microarrays esterilizado y recubierto de agarosa con múltiples puntos de polímero en una placa de pocillos múltiples. La agarosa minimiza la unión bacteriana inespecífica.

Agregue un cultivo bacteriano mixto al portaobjetos e incube con agitación suave.

Las bacterias secretan distintas proteínas de adhesión que se unen a puntos de polímero favorables, lo que resulta en una unión bacteriana más fuerte y una colonización con el tiempo.

Por el contrario, los polímeros repelentes resisten la adsorción de proteínas y reducen la unión bacteriana.

Enjuague el portaobjetos con solución salina tamponada con fosfato o PBS para eliminar las bacterias sueltas.

Agregue DAPI para teñir el ADN de las bacterias adheridas a la superficie.

Lave el portaobjetos con PBS, séquelo y séllelo con un cubreobjetos adhesivo.

Esterilice la superficie exterior del portaobjetos con etanol.

Capture imágenes de campo claro para localizar los puntos de polímero. Luego, cambie al modo de fluorescencia para detectar la fluorescencia en los puntos de polímero.

Las manchas de polímero que exhiben una fluorescencia reducida indican una unión bacteriana mínima y se identifican como polímeros repelentes