Ensayo de enjambre para visualizar la motilidad de la superficie bacteriana

0 vistas2:46 min • September 26th, 2025

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Comience con un tubo que contenga bacterias móviles que expresen proteínas fluorescentes verdes.

Con una aguja, detecte las bacterias en una placa de agar de nutrientes blandos para estudiar la motilidad de la superficie bacteriana.

A continuación, invierta la placa para evitar la condensación de agua en la superficie del agar.

Incube la placa para permitir que las bacterias crezcan.

A medida que avanza la incubación, las bacterias usan sus flagelos para iniciar la migración hacia afuera desde el punto de inoculación.

Una vez completada la incubación, abra la tapa y coloque la placa invertida en un sistema de imágenes, con el lado del agar hacia el detector óptico, para garantizar imágenes precisas.

Coloque la tapa llena de agua sobre el plato. Séllalo para mantener un ambiente húmedo.

Cierre el sistema de imágenes e inicie la adquisición de imágenes de lapso de tiempo.

Con el tiempo, la migración bacteriana genera proyecciones verdes en forma de dedos llamadas zarcillos. Estas estructuras bacterianas se extienden hacia afuera desde el punto central de inoculación, lo que confirma la motilidad de la superficie bacteriana.

Inocular de uno a cinco microlitros del cultivo durante la noche sobre las placas de agar de enjambre secas pinchando la superficie del agar con un palillo de dientes estéril o una aguja de inoculación de alambre, dependiendo de la cepa de bacterias, transfiera las placas de ensayo de enjambre a una incubadora con una temperatura establecida en 30 grados Celsius, 37 grados Celsius o 42 grados Celsius. Invierta las placas de modo que el exceso de humedad se condense en la tapa de la placa y no en el agar, equilibre las bacterias a temperaturas específicas de la cepa durante dos o cuatro horas justo antes de las imágenes de lapso de tiempo.

A continuación, transfiera las placas a la unidad de imágenes in vivo de modo que las bacterias en la superficie del agar estén orientadas hacia abajo hacia la cámara invertida de la unidad. Llene todas las tapas de las placas de Petri con una pequeña cantidad de agua. Luego coloque cada tapa con el lado del agua hacia arriba encima de las placas de agar invertidas.

Dentro de la unidad de imágenes, selle la carcasa de imágenes para mantener un nivel de humedad constante, ajuste la configuración de imágenes de la unidad de imágenes y comience a obtener imágenes de lapso de tiempo de la actividad de enjambre. Después de las imágenes en tiempo real, la dinámica de enjambre de las bacterias se puede analizar utilizando análisis de imágenes estándar como la Imagen J.

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Última actualización: 1 agosto 2026