Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:05 min. • September 26th, 2025
Comience con un tubo estéril que contenga un medio de crecimiento específico para el huésped. Agregue un cultivo bacteriano huésped cultivado durante la noche.
Luego, introduzca un filtrado que contenga Saccharibacteria, una bacteria ultrapequeña parásita, para establecer un cultivo binario.
Incubar el cultivo binario en condiciones microaeróbicas que sean óptimas para la bacteria huésped.
Los nutrientes en el medio promueven el crecimiento y la proliferación de bacterias huésped, lo que hace que el cultivo sea turbio.
Debido a su naturaleza parasitaria obligada, las Saccharibacteria se adhieren a la superficie de las células bacterianas del huésped.
Estas bacterias luego forman estrechos contactos de membrana con el huésped y extraen nutrientes esenciales para su supervivencia y proliferación.
A medida que avanza la infección, el crecimiento del huésped bacteriano se ralentiza, lo que resulta en una reducción de la turbidez.
Para apoyar el crecimiento continuo, transfiera el cultivo binario a un medio fresco a intervalos regulares.
Esto mantiene la viabilidad del huésped y promueve la estabilidad a largo plazo de la cultura binaria.
Prepare los tubos de cultivo alícuotas dos mililitros de medios de cultivo apropiados en los tubos.
Luego, agregue 200 microlitros de cultivo nocturno de organismos huéspedes y de 100 a 200 microlitros de muestra filtrada resuspendida a cada tubo. Incubar las muestras combinadas en condiciones apropiadas para el organismo huésped. Pasar las células cada dos o tres días transfiriendo 200 microlitros del cultivo binario a dos mililitros de medio de crecimiento fresco en un tubo nuevo.
Si los cultivos pasados no muestran crecimiento a 200 microlitros de cultivo huésped no infectado, al pasar las células, devuelva los tubos inoculados a la incubadora.