Expresión del operón de luminiscencia en bacterias bioluminiscentes marinas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:14 min. • September 26th, 2025
Comience con una cepa bacteriana bioluminiscente marina que lleve el operón de luminiscencia, que codifica la luciferasa y las enzimas necesarias para la síntesis de sustratos.
Raya la cepa en una placa de agar rica en nutrientes suplementada con agua de mar artificial para imitar la salinidad nativa y apoyar el crecimiento.
Incubar para obtener colonias discretas, luego aislar e inocular una sola colonia en un medio líquido que contenga agua de mar artificial.
Incubar con agitación para promover el crecimiento nocturno en la fase exponencial.
Transfiera un volumen definido del cultivo durante la noche a un medio fresco e incube para aumentar la densidad bacteriana.
A medida que la población se expande, las bacterias liberan autoinductores, moléculas de señalización que se acumulan y difunden en las células, donde se unen a los receptores intracelulares, activando el operón de luminiscencia.
Esta activación induce la expresión de luciferasa y la biosíntesis del sustrato.
La luciferasa cataliza la oxidación del sustrato, emitiendo luz azul verdosa.
Monitorear el cultivo para detectar bioluminiscencia como indicador de activación de operones de luminiscencia y emisión de luz en bacterias mar
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