Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:27 min. • September 26th, 2025
Comience con un cultivo de E. coli pretratado con un antibiótico.
Este antibiótico bloquea la división celular, lo que resulta en la formación de células filamentosas alargadas con mayor contenido de ADN.
Coloque una porción del cultivo en una placa de agar rica en nutrientes e incube.
Las células filamentosas no se dividen a pesar del crecimiento continuo; Solo las células no filamentosas forman colonias, lo que resulta en recuentos bajos de colonias.
Diluya el cultivo bacteriano restante y agregue un tinte fluorescente de unión al ADN. Luego, incube en la oscuridad.
El tinte ingresa a las células y se une al ADN.
Agite la muestra y luego pásela a través de un citómetro de flujo.
La cantidad de luz dispersa de cada celda corresponde a su tamaño.
De manera similar, la fluorescencia emitida por los ácidos nucleicos unidos a colorantes indica el contenido de ADN bacteriano.
Las células tratadas con antibióticos muestran un aumento de la dispersión y la fluorescencia, lo que refleja un crecimiento filamentoso y una replicación continua del ADN sin división.
Esto demuestra modificaciones en la fisiología bacteriana causadas por antibióticos inhibidores de la división celular.
Preparar diluciones
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