Inactivación de bacterias mediante mononucleótido de flavina activado por luz

Comience inoculando una bacteria patógena en un tubo que contenga un medio líquido.

Incube para promover la proliferación bacteriana, luego transfiera el cultivo a tubos frescos.

Gire las células en gránulos y deseche el sobrenadante.

Vuelva a suspender los gránulos bacterianos en soluciones tampón que contengan concentraciones crecientes de mononucleótido de flavina (FMN), un fotosensibilizador y una solución tampón sin FMN para que sirvan como control.

Mezcle bien el contenido del tubo y transfiera las suspensiones a tubos de vidrio.

Exponga los tubos a la luz visible para fotoactivar FMN, que reacciona con el oxígeno molecular para generar especies reactivas de oxígeno (ROS).

El ROS daña los componentes celulares bacterianos, reduciendo así la viabilidad bacteriana.

Transfiera las alícuotas de muestra a medios sólidos, extiéndalas uniformemente e incube para permitir que las bacterias viables supervivientes se conviertan en colonias.

Después de la incubación, cuantificar las colonias y calcular el porcentaje de reducción de la viabilidad bacteriana en comparación con el control para evaluar el efecto dosis-dependiente de FMN.

Inocular una colonia de Staphylococcus aureus en 10 mililitros