Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:19 min. • September 26th, 2025
Tome jeringas que contengan tiras poliméricas libres de antibióticos y cargadas de antibióticos.
Llene las jeringas con un cultivo metabólicamente activo de bacterias patógenas.
Incube las jeringas agitándolas para garantizar una exposición bacteriana uniforme al medio.
Durante la incubación, los antibióticos de la tira cargada se difunden en el medio e inhiben el crecimiento bacteriano.
En la jeringa con la tira libre de antibióticos, las bacterias proliferan.
Recoja la suspensión bacteriana de cada jeringa en tubos de microcentrífuga.
Transfiera las alícuotas a una placa de varios pocillos.
Agregue una mezcla de reactivos que contenga luciferina, enzima luciferasa y un agente de lisis.
Incubar con agitación para permitir la lisis bacteriana, que libera componentes celulares, incluido el ATP. El ATP impulsa la reacción luminiscente mediada por luciferasa.
Usando un lector de microplacas, registre la luminiscencia.
El cultivo bacteriano expuesto a la tira cargada de antibióticos exhibe una luminiscencia reducida en comparación con el cultivo no expuesto a antibióticos.
Esta luminiscencia reducida confirma la eficacia antibacteriana de la tira cargada de antibióticos.
Coloque las tiras de UHMWPE vírgenes y cargadas de medicamentos dentro de una jeringa de tres mililitros. Luego, extraiga la suspensión bacteriana que contiene MHB en la jeringa a través de la aguja adjunta hasta la marca de 1,5 mililitros.
Coloque la configuración de la jeringa en una incubadora agitadora hasta los puntos de tiempo indicados de seis horas, y luego todos los días hasta el día siete. Después de cada punto de tiempo indicado, saque la configuración de la jeringa y dispense el medio en un tubo de dos mililitros. Realizar un ensayo de viabilidad microbiana en tiempo real como se describe en el manuscrito utilizando 100 microlitros de suspensión bacteriana.