Ensayo de biosensor bacteriano para detectar mercurio biodisponible en condiciones anaeróbicas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:26 min. • October 30th, 2025
Comience con una configuración de ensayo que contenga viales colocados dentro de una cámara anaeróbica.
Cada vial contiene medios suplementados con nitrato de sodio, iones de mercurio y concentraciones variables de sulfato de magnesio.
Gire la configuración para mezclar los componentes, luego incube.
Durante la incubación, el sulfato de magnesio promueve la formación de complejos de mercurio no biodisponibles, reduciendo los iones de mercurio libres y biodisponibles de una manera dependiente de la concentración.
A continuación, agregue biosensores inducidos, bacterias modificadas genéticamente que transportan un plásmido y mezcle.
El plásmido contiene un regulador transcripcional sensible al mercurio y un promotor vinculado a un gen reportero fluorescente.
En condiciones anaeróbicas, las bacterias utilizan nitrato para respirar.
Los iones de mercurio libres ingresan a las células, se unen al regulador transcripcional y activan el gen fluorescente, produciendo proteínas fluorescentes.
Transfiera las alícuotas de cada vial a una placa de pocillos múltiples.
Con un lector de placas, mida la intensidad de la fluorescencia.
Una disminución de la fluorescencia con el aumento de las concentraciones
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos