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Microbiología
0 vistas • 2:52 min • October 30th, 2025
Comience inoculando una suspensión de bacterias reductoras de metales en un medio de cultivo con iones metálicos.
Incubar con rotación para promover el crecimiento y facilitar la absorción de iones metálicos.
Los iones metálicos se difunden en las células y se reducen enzimáticamente a óxidos metálicos insolubles.
Estos óxidos se excretan y nuclean cerca de la membrana bacteriana, donde se autoensamblan en microcápsulas rígidas de óxido metálico fuera de las células.
Después de la incubación, ultrasonique la suspensión para disociar las bacterias de las microcápsulas.
Centrifugar la mezcla para granular las microcápsulas densas y desechar el sobrenadante.
Lave el gránulo con agua, luego ultrasonicate. Centrifugar nuevamente para separar las bacterias de las microcápsulas.
A continuación, agregue etanol para reducir la tensión superficial.
Ultrasónica de nuevo para desalojar las bacterias restantes y dispersar las microcápsulas.
Centrifugar nuevamente y desechar el sobrenadante.
Repita el lavado con etanol.
Finalmente, selle los tubos para evitar el secado y la deformación de las microcápsulas purificadas.
Recupere el cultivo que contiene las bacterias monoclonales y agregue 50 microlitros en cada uno de los diez tubos de centrífuga de 50 mililitros que contienen el medio de tungstato de sodio.
Incube los diez tubos en una incubadora a 37 grados centígrados durante 120 horas. Después de la incubación, coloque cada uno de los tubos en un ultrasonido y sonique las células a 20 kilohercios con 150 vatios durante una hora.
Centrifugar los tubos y luego eliminar el líquido transparente con una pipeta.
A continuación, agregue agua y luego sonique y centrifugue los tubos una vez más.
Después de la segunda centrifugación, retire el líquido transparente de los tubos con una pipeta.
Luego agregue 35 mililitros de etanol al 99,8% y vuelva a ultrasonicar las muestras.
Enjuague los minerales centrifugándolos, agregando alcohol y sonicando la muestra una vez más.
A continuación, retire el líquido transparente de los tubos con una pipeta y tape inmediatamente los tubos sin secar la muestra.