Cuantificación de unidades formadoras de colonias de bacterias asociadas al intestino en moscas Drosophila

Comience con una microplaca que contenga homogeneizados preparados a partir de moscas Drosophila . Estas moscas albergaban una población controlada de una bacteria específica en su intestino.

Los homogeneizados contienen tejidos de mosca lisados y bacterias intestinales liberadas.

Aspire las bacterias suspendidas y diluya en serie en múltiples microplacas.

Detecte pequeños volúmenes de cada dilución en placas de agar, asegurándose de que las gotas permanezcan separadas.

Incubar para permitir que las bacterias proliferen en colonias visibles.

Capture imágenes de las placas para cuantificar las unidades formadoras de colonias (UFC), que representan el número de células bacterianas viables capaces de formar colonias individuales.

Con el software de análisis de imágenes, alinee cada imagen usando una línea de referencia, defina un límite y aplique una cuadrícula uniforme para segmentarla en zonas de conteo, cada una correspondiente a un solo punto.

Ajuste el umbral de brillo para distinguir las colonias individuales del fondo, luego ejecute el análisis para contar las colonias en cada punto y cuantificar las UFC.

Coloque tres placas de crecimiento rectangulares de agar MRS con las tapas abiert