Interrupción mecánica de gusanos individuales para evaluar la variabilidad en las interacciones huésped-bacteria
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 5:09 min. • October 30th, 2025
Comience con gusanos adultos de C. elegans recién matados, estériles y de la misma edad con cutículas permeabilizadas, suspendidos en tampón.
Estos gusanos están infectados con bacterias en sus tractos intestinales.
Tome una placa de pocillo profundo que contenga partículas abrasivas en tampón y transfiera un solo gusano a cada pocillo.
Cubra el plato con una película de sellado y una tapa.
Incube la placa a baja temperatura para evitar el sobrecalentamiento durante la alteración del tejido.
Presione la tapa para sellar los pocillos.
Con un disruptor tisular, agite mecánicamente la placa. Las partículas abrasivas alteran los tejidos de los gusanos, liberando bacterias intestinales.
Golpee la placa y centríquela para granular el contenido.
Mezcle el contenido para distribuir uniformemente las bacterias, luego transfiéralas a pozos frescos.
Diluir en serie la suspensión bacteriana en tampón.
Coloque las diluciones en placas de agar e incube para permitir la formación de colonias.
Cuente las colonias para cuantificar la variación en las cargas bacterianas intestinales en gusanos individuales.
Para prepararse para la interrupción mecánica de los gusanos, obtenga una placa estéril de 96 pocillos de
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