Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:03 min. • October 30th, 2025
Comience con un cultivo de Legionella pneumophila, una bacteria patógena.
Estas células bacterianas poseen un sistema de secreción en su membrana, que es esencial para la infección del huésped.
Suspenda las células bacterianas en agua estéril para lograr la densidad requerida para las imágenes de tomografía electrónica criogénica (crio-ET).
Agregue nanopartículas de oro, que sirven como puntos de referencia para la alineación de imágenes durante la reconstrucción tridimensional.
Tome una rejilla con una película de carbono perforada para depositar la muestra bacteriana.
Coloque la rejilla dentro de una cámara llena de gas y aplique una descarga eléctrica para hacer que la superficie sea más hidrófila.
Aplique la suspensión a la rejilla, permitiendo que el líquido se extienda uniformemente por la superficie y que las células se asienten.
Retire el exceso de agua de la rejilla y sumérjala en un medio de congelación líquido para congelar la muestra y preservar su arquitectura celular.
La muestra ahora está lista para la obtención de imágenes crio-ET del sistema de secreción bacteriana.
Para preparar la muestra de criotomografía electrónica, cultive un parche pesado de Legionella Pneumophila en
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