Cultivo de la bacteria Vibrio natriegens de rápido crecimiento

Tome un tubo que contiene un cultivo de Vibrio natriegens, una bacteria de rápido crecimiento.

Centrifugar el cultivo para granular las bacterias. Deseche el sobrenadante que contiene el medio residual.

Vuelva a suspender el gránulo bacteriano en un medio nuevo y transfiéralo a un matraz cónico que contenga el mismo medio para la preparación del cultivo bacteriano.

Incube el cultivo agitando en condiciones aireadas.

Debido a un corto tiempo de generación, Vibrio natriegens utiliza nutrientes y se divide rápidamente para generar una población bacteriana concentrada.

Usando un espectrofotómetro, controle regularmente la densidad óptica (OD) para determinar la concentración bacteriana.

Cultive el cultivo hasta que la OD alcance aproximadamente uno, lo que indica una fase de crecimiento exponencial con alta actividad metabólica.

Transfiera el cultivo a tubos de centrífuga.

Centrifugar a baja temperatura para separar las bacterias preservando la integridad celular.

Coloque el tubo sobre hielo y retire el sobrenadante que contiene desechos celulares.

Almacene el gránulo bacteriano a temperatura ultrabaja para su análisis posterior.

Para comenzar, lave un mililitro del cultivo nocturno de Vibrio nat