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Comience con un cultivo de filamentos de lagunas de Phormidium .
Homogeneizar brevemente el cultivo para romper los grupos de filamentos y generar una suspensión uniforme.
Transfiera la muestra homogeneizada a una placa de Petri y déjela reposar.
Cubra el plato con celofán para reducir la evaporación.
Coloque un portaobjetos en la platina del microscopio para que sirva como plataforma de soporte.
Coloque la placa que contiene la muestra directamente encima del portaobjetos.
Utilice una lente de objetivo de baja potencia y concéntrese en los filamentos bacterianos suspendidos en el medio para observar su movimiento.
Los filamentos muestran un movimiento lento y deslizante a través de la superficie, impulsado por pili tipo IV, las fibras microscópicas ensambladas en la membrana interna y que emergen a través de la membrana externa.
Estas fibras se extienden y retraen para tirar de las células hacia adelante, lo que les permite deslizarse.
Este ensayo revela la motilidad de deslizamiento característica de Phormidium lacuna en un ambiente líquido.
Cultivar P. lacuna en medio F2 bajo agitación horizontal de 50 RPM con luz blanca durante unos cinco días hasta que la densidad óptica estimada a 750 nanómetros sea de 0,35. Almacene la muestra a cuatro grados centígrados. Homogeneizar los filamentos con ultrasonidos durante un minuto a máxima potencia y ciclo de uno.
Mida la densidad óptica a 750 nanómetros y transfiera ocho mililitros del medio que contiene P. lacuna a una placa de Petri de seis centímetros. Espere unos minutos hasta que la muestra alcance la temperatura ambiente y luego cubra la placa de Petri con papel de celofán. Coloque un portaobjetos de microscopio en la mesa X-Y de un microscopio estándar con una cámara.
Encienda la luz del microscopio y mueva un objetivo 4X o 10X en la trayectoria de la luz. Luego, coloque la placa de Petri encima del portaobjetos. Ajuste filamentos individuales o haces de filamentos según los movimientos X, Y y Z de la mesa.
Observe los movimientos de filamentos individuales o haces y registre los movimientos con una cámara de microscopio estándar. Asegúrese de que la lente del objetivo no toque el líquido.