Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 1:59 min. • November 28th, 2025
Comienza con cultivos nocturnos de cepas de Vibrio cholerae , bacterias patógenas cultivadas en un medio rico en nutrientes.
Centrifuga los cultivos para pelletar las células. Retira el sobrenadante que contiene compuestos extracelulares y vuelve a suspender el pellet en solución salina.
A continuación, sumerge un inoculador estéril de alambre en el cultivo y pinchalo verticalmente en el agar de motilidad para depositar las bacterias bajo la superficie sin propagación lateral.
Esteriliza el inoculador con llama entre cada cepa para evitar la contaminación cruzada.
Incuba la placa para permitir que las bacterias migren a través del agar de motilidad.
El agar contiene cloruro de trifeniltetrazolio, o TTC, un indicador redox que se vuelve rojo al reducirlo por células metabólicamente activas.
Las cepas móviles reducen la TTC a lo largo de una amplia área, formando una gran zona roja, mientras que las cepas no móviles presentan tinciones confinadas a la línea de espuñal.
El tamaño y la dispersión de las zonas rojas indican la motilidad de cada cepa.
Lava el pellet de células obtenido de cultivo nocturno. Inocular las placas de agar de motilidad insertando una punzada inoculante en el cultivo líquido lavado y apuñalar verticalmente en el medio.
Asegúrate de que la punzada inocular no se doblegue al pinchar el agar. Entre cada inoculación, esteriliza la punzada de alambre usando un mechero Bunsen. Incuba las placas con la tapa hacia arriba durante 14-24 horas a 37 grados Celsius.
Tras 14 horas, vigila detenidamente las placas de motilidad para evitar el crecimiento excesivo de cultivos.