Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:18 min. • November 28th, 2025
Toma un cultivo bacteriano que haya sido cultivado bajo una condición de estrés durante un periodo prolongado.
El estrés a largo plazo provoca mutaciones espontáneas, selección natural y la proliferación de bacterias adaptadas al estrés.
Para aislar estas bacterias, coloca un pequeño volumen del cultivo en una placa de agar que contenga el mismo factor de estrés e incuba.
El factor estresante garantiza el crecimiento únicamente de colonias bacterianas adaptadas al estrés.
Elige una sola colonia para mantener la pureza genética e inocula el medio líquido con el factor estresante.
Incubar con agitación para facilitar el crecimiento de bacterias adaptadas al estrés.
Utiliza un pequeño volumen de cultivo para inocular el medio fresco con el factor estresante.
Simultáneamente, inocular otro medio que contiene el factor estresante con bacterias salvajes o no adaptadas al estrés.
Mide la absorbancia a intervalos regulares como indicador del crecimiento bacteriano.
Compara el perfil de crecimiento para asegurar el aislamiento exitoso de bacterias adaptadas al estrés.
Preparar un medio de placa de agar al 1,6% que contenga el mismo factor de estrés a la misma concentración que en el medio. Extrae 0,1 mililitros del cultivo de salida del quimostato e incuba a 37 grados Celsius durante 16 horas. Tras la incubación, se extraen colonias individuales de la placa usando un palillo estéril e inóculanlas en tubos de ensayo de 15 mililitros que contengan el mismo factor de estrés y a la misma concentración media que en el quimostato.
Incuba durante seis horas. Transfiere un mililitro del caldo de cultivo a un matraz Erlenmeyer de 250 mililitros que contenga 50 mililitros de medio. Cosecha 0,5 mililitros del caldo de cultivo cada hora y mide la densidad óptica a 600 nanómetros.
Comparar la tasa de crecimiento de la deformación adaptada con la de la deformación tipo salvaje dado el factor de estrés