Un enfoque basado en cromatografía líquida–espectrometría de masas para analizar metabolitos de S. aureus

Comienza con Staphylococcus aureus suspendido en una solución de temple que contiene perlas de sílice, almacenadas a baja temperatura para preservar su estado metabólico.

Homogeneizar las bacterias en condiciones frías para liberar contenido intracelular minimizando la degradación enzimática de los metabolitos.

Centrifuga el lisado y cosecha el supernadante rico en metabolitos.

Añade un disolvente orgánico al extracto y al vórtice para precipitar macromoléculas a partir de metabolitos solubles.

Centrifugar para pelletar el precipitado y transferir el sobrenadante a viales.

Carga los viales en un sistema de cromatografía líquida-espectrometría de masas.

Dentro de la columna de cromatografía, los metabolitos interactúan con la fase sólida estacionaria según sus propiedades químicas.

Añade un tampón para eluir los metabolitos. Luego, dirige los metabolitos hacia la fuente de ionización por electrospray del espectrómetro de masas para ionizarlos.

Los iones se separan entonces según su relación masa-carga.

Los datos resultantes se comparan con una base de datos de referencia para identificar los metabolitos.

Para comenzar la extracción del metabolito, primero descongela las muestras sobre hielo h