Localización bacteriana e interacción del huésped en tejido pulmonar humano por imagen

Tomemos una suspensión de Staphylococcus aureus marcada con fluorescencia y tejido pulmonar alveolar humano infectado con las mismas bacterias marcadas con fluorescente.

Inserta la punta distal de la sonda de microscopía de fluorescencia confocal fibrada en la suspensión bacteriana y escanea.

Las señales fluorescentes brillantes confirman el marcaje de membranas bacterianas y la activación exitosa de la sonda

Registra la fluorescencia a medida que la sonda avanza por la suspensión.

Utilizando un tejido de limpieza de lentes embebido en peróxido de hidrógeno, limpia la sonda para eliminar bacterias residuales y evitar la fluorescencia de fondo

Lleva la sonda limpia a contacto directo con el tejido y escanea la superficie.

En el tejido, las fibras de colágeno y elastina aparecen como una matriz autofluorescente, mientras que las bacterias marcadas fluorescentemente son visibles como puntos brillantes distintos.

Los espacios alveolares, carentes de fluorescencia, aparecen como regiones oscuras.

Graba un vídeo para capturar tanto bacterias adheridas al tejido como bacterias de forma laxa, permitiendo la visualización en tiempo real de la infección bacteriana en el tejido alveolar pulmonar del huésped.

Para comenzar la recogida de datos, haz clic en iniciar en pantalla o pulsa el pedal izquierdo para encender el láser. A continuación, toma imágenes de cada una de las muestras de suspensión bacteriana. Inserta el extremo distal de la fibra de imagen FCFM y mueve la fibra lentamente a través de la suspensión para examinar la muestra.

Graba vídeos de cualquier longitud pulsando el pedal derecho o seleccionando los controles de grabación en pantalla mientras la fibra se mueve lentamente alrededor de la muestra. Limpia el extremo distal de la fibra de imagen FCFM con peróxido de hidrógeno al 8% y tejidos de limpieza de lentes entre muestras. Para obtener imágenes de cada muestra de tejido pulmonar, inserta el extremo distal de la fibra de imagen FCFM en la muestra, asegurando que se produzca contacto directo entre el extremo de la fibra y el tejido.

Luego mueve suavemente el extremo de la fibra de imagen para examinar la muestra. Levantar el extremo de la fibra alejándolo del tejido se retirará del plano focal. Sin embargo, esto puede usarse para obtener imágenes de bacterias marcadas que no están adheridas al tejido.

Graba vídeos de cualquier longitud pulsando el pedal derecho o seleccionando los controles de grabación en pantalla mientras la fibra se mueve lentamente alrededor de la muestra.