Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:04 min. • January 30th, 2026
Comienza con un cultivo de Legionella pneumophila, una bacteria patogénica Gram negativa que libera vesículas de membrana externa.
Estos OMVs contienen lipopolisacáridos y proteínas de membrana que contribuyen a la virulencia bacteriana.
Centrifuga el cultivo para pelletar bacterias intactas.
Recoge los OMVs que contienen el sobrenadante y centrifuga de nuevo para pelletar bacterias residuales.
Filtra el sobrenadante a través de una membrana para eliminar las bacterias restantes mientras retienes los OMVs.
Realiza una segunda filtración utilizando una membrana fresca para eliminar los restos bacterianos.
Recoge el filtrado libre de bacterias y ultracentrífuga para pelletar los OMVs.
Descarta el sobrenadante, vuelve a suspender el pellet en el tampón y vuelve a ultracentrífuga para eliminar proteínas y lipopolisacáridos ligeramente asociados.
Quita el sobrenadante y vuelve a suspender los OMVs purificados en buffer.
Estria una alícuota de los OMVs sobre las placas de agar sanguíneo y BCYE e incuba.
La ausencia de formación de colonias confirma la ausencia de contaminación bacteriana.
Almacena los OMVs a baja temperatura para los estudios de interacción huésped-patógeno.
Añade el cultivo líquido
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