Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 4:02 min. • February 2nd, 2026
Tomemos ARN total extraído de un cerebro de ratón infectado con bacterias patógenas. El extracto contiene transcripciones de genes sensibles a la infección.
Añadir una enzima que degrada el ADN e incubar para degradar el ADN genómico residual.
Añade una mezcla maestra que contenga la enzima transcriptasa inversa (RT), nucleótidos y cebadores inespecíficos.
Incubar para sintetizar ADN complementario (ADNc).
Introduce una temperatura alta para inactivar la enzima RT.
Toma una mezcla maestra que contiene ADN polimerasa, nucleótidos, un colorante de doble cadena que se une al ADN y cebadores específicos para un gen objetivo.
Añade el ADN c y aplica calor para desnaturalizar el ADN.
El cebador se une al ADN c-objetivo, permitiendo la síntesis de nuevas cadenas de ADN.
El ciclo se repite para amplificar el gen objetivo.
El tinte se une al ADN amplificado y emite fluorescencia, que se registra al final de cada ciclo.
El aumento de la fluorescencia confirma la expresión del gen sensible a la infección en el cerebro del ratón infectado.
Infectar a todos los ratones utilizando células planctónicas o células del estado de biofilm y realizar la eutanasia según lo descrito en el protocolo de texto. A cont
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