Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:24 min. • February 2nd, 2026
Comienza con un ratón anestesiado que presenta dos heridas excisionales de espesor completo en el dorso, con ambas capas epidérmica y dérmica removidas quirúrgicamente.
Un apósito transparente cubre las heridas para aislar el lugar y evitar la contaminación externa.
Permite que el ratón se recupere durante un periodo definido.
Durante este tiempo, la sangre que contiene diferentes componentes entra en la herida. Esto activa las plaquetas, desencadenando el ensamblaje de una matriz provisional compuesta por fibrina, fibronectina y proteoglicanos, e inicia la formación de coágulos sanguíneos.
Re-anestesiar al ratón e inyectar solución salina en cada costado para mantener la hidratación.
A continuación, inyecta una dosis definida de una cepa luminiscente de Pseudomonas aeruginosa a través de la película en cada herida.
Las bacterias se asientan dentro de la matriz provisional, que favorece su inserción y crecimiento.
Juntas, la matriz y el vendaje de película proporcionan un entorno favorable para la formación de biofilm, lo que resulta en una infección crónica localizada.
Registra la luminiscencia para monitorizar la infección bacteriana.
24 horas después de la cirugía, pesa de nuevo al ratón reanestesiado e inyecte subcutáneamente al animal 250 microlitros de cloruro de sodio estéril precalentado al 0,9% en ambos flancos.
A continuación, carga 100 microlitros de la suspensión luminosa de la cepa P. aeruginosa en una jeringuilla de seguridad de tuberculina de 500 microlitros equipada con una aguja calibre 27 e inyecta 40 microlitros de suspensión bacteriana a través del apósito transparente en cada herida.
Asegúrate de que la suspensión bacteriana esté bien mezclada y que el apósito transparente esté intacto. Asegúrate de pinchar el apósito transparente solo una vez con la aguja, con el bisel hacia arriba.
Luego devuelvo al ratón a su jaula sobre una almohadilla eléctrica con control y proporciona una pasta de suplementos nutricionales de alto contenido calórico entre los pellets en el suelo de la jaula.