Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:40 min. • February 2nd, 2026
Comienza con una lámina que contiene un mosquito adulto anestesiado en una gota de suero fisiológico o PBS protegido con fosfato.
Bajo un microscopio disecador, retira las patas, alas y cabeza del mosquito.
Corta la punta del abdomen para evitar dañar el tracto digestivo.
Asegura el tórax y la punta del abdomen, luego saca suavemente el tracto digestivo para extraerlo.
El tracto digestivo extraído incluye el intestino medio, que es responsable de la digestión y alberga diversas bacterias intestinales que influyen en la fisiología de los mosquitos.
Con mayor aumento, retira cuidadosamente las estructuras circundantes para aislar el intestino medio.
Transfiere el intestino medio aislado a un tubo fresco que contenga PBS.
Homogeneiza el intestino medio para liberar las bacterias en el PBS.
Esparce el homogenado diluido sobre una placa de agar nutritivo.
Incubar la placa para permitir el crecimiento de colonias bacterianas, que representan la flora microbiana del intestino medio del mosquito.
Diseca el mosquito por separado en una lámina de vidrio estéril que contiene una gota de PBS. Retira cuidadosamente las patas, alas y cabeza del mosquito usando pinzas.
Clampea el pecho del mosquito y la última sección del abdomen con pinzas y separa para aislar el tracto digestivo.
Utiliza pinzas para eliminar el cultivo y el tubo de Malpighi del tracto digestivo. El cultivo se sitúa en la parte anterior del intestino medio y se abulta tras ingerir agua azucarada. Los tubos de Malpighi son un grupo de tubos excretores delgados situados en la unión entre el intestino medio y el intestino posterior.
Coloca el intestino medio diseccionado en un tubo EP con un buffer PBS estéril de 200 microlitros y muélitalo con el manodillo estéril en el banco súper limpio. Diluir en serie el homogenado a tres diluciones de 10 veces a 50 microlitros de cada dilución en la placa de agar LB y luego extender la placa.
Incuba la placa a 37 grados durante uno o dos días hasta que se vean colonias individuales.