Imagen en tiempo real de infección bacteriana en un modelo murino utilizando bioluminiscencia

Toma un ratón anestesiado preinfectado con una cepa bacteriana patógena diseñada para expresar un operón bioluminiscencia integrado genéticamente.

El operón codifica la luciferasa y un complejo multienzimático que sintetiza su sustrato.

La enzima luciferasa cataliza una reacción con estos sustratos, produciendo luminiscencia visible.

Colocar al ratón en posición supina sobre la plataforma estabilizada por temperatura de una cámara de imagen y mantener la anestesia durante la imagen.

Utiliza el sistema de imagen para capturar tanto imágenes bioluminiscentes como las correspondientes de rayos X del ratón.

La imagen bioluminiscente revela la extensión de la infección bacteriana, mientras que la imagen de rayos X proporciona una referencia anatómica para la localización de la infección.

Después de la imagen, devuelvo al ratón a su jaula y permite la recuperación.

Capturar imágenes de bioluminiscencia a intervalos regulares para monitorizar la progresión en tiempo real de la infección bacteriana.

Con el tiempo, la presencia de señales bioluminiscentes en varios lugares confirma la propagación de la infección por todo el huésped.

Para obtener imágenes de los animales, prepara el sistema de imagen ajustando los parámetros de la cámara y calentando el escenario. Ajusta el flujo de oxígeno a 1,5 litros por minuto y el isoflurano al 3,5% y mueve al ratón a la cámara anestésica, luego a la etapa estabilizada con temperatura, tras la anestesia. Coloca el ratón boca arriba con los brazos extendidos y coloca un cono nasale para la administración de isoflurano al 2,5% durante la imagen.

Cierra la puerta y toma imágenes bioluminiscentes y radiografías del ratón. Cuando termines la imagen, devuelvo al ratón a su jaula y vigílalo. Debería recuperar la conciencia en 3 a 5 minutos.