Imágenes en vivo de las interacciones huésped-patógeno en embriones de pez cebra infectados con Mycobacterium abscessus

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Comienza con embriones de pez cebra anestesiados, transparentes y transgénicos que expresan macrófagos marcados con fluorescencia.

Los embriones se preinyectan en el músculo caudal con una cepa rugosa marcada por fluorescencia de Mycobacterium abscessus para inducir una infección localizada.

La ausencia de glicopeptidolípidos superficiales en estas bacterias favorece su agregación.

Inmoviliza los embriones en agarosa de bajo punto de fusión y orienta para exponer el lugar de la infección.

Una vez que la agarosa se solidifique, añade agua para peces que contenga un agente anestésico para mantener la anestesia y evitar la deshidratación.

Monitoriza la infección en tiempo real mediante microscopía de fluorescencia.

Tras la infección, los macrófagos endógenos migran hacia las bacterias y fagocitan células individuales.

Sin embargo, algunas bacterias forman cordones —agregados extracelulares alargados que se replican, se propagan y resisten la fagocitosis, causando la muerte de las células huésped e infiltración inmunitaria.

A pesar de ello, las células inmunitarias no logran eliminar las cuerdas, lo que permite que las bacterias y las células muertas del huésped se acumulen y formen un absceso.

Esto revela que el cordón es una M clave. estrategia de evasión inmune de abscesos .

Para imágenes en vivo de la infección por M. absceso , montar embriones anestesiados con tricaína en agarosa de bajo punto de fusión al 1% en una placa de Petri de 35 milímetros con fondo de vidrio para microscopio invertido o en una lámina de depresión de cavidad única para microscopía confocal vertical. Orientar el embrión en la posición deseada y cubrir la agarosa solidificada con agua de pescado que contenga tricaína. Finalmente, utiliza un microscopio de fluorescencia con objetivo 10X o un microscopio confocal de fluorescencia con objetivos 40X o 63X para adquisición secuencial de fluorescencia e imagen por transmisión del embrión.

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Identificación de marcadores de virulencia de Mycobacterium abscessus para la replicación intracelular de fagocitos

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Last updated: 27 June 2026