Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:19 min. • February 2nd, 2026
Comienza con un cultivo de una cepa de Aeromonas , un patógeno bacteriano, cultivado en un medio rico en nutrientes.
Mide la densidad óptica del cultivo y ajusta la concentración bacteriana para asegurar una carga de infección constante.
Placar el cultivo sobre un medio de crecimiento de nematodos o agar NGM e incubar para formar una capa bacteriana uniforme.
Preparar larvas sincronizadas con el desarrollo de C. elegans , un nematodo bacteriórico mantenidas en un medio enriquecido.
Transfiere las larvas a la capa bacteriana e incuba para permitir la ingestión oral de Aeromonas y facilitar la colonización intestinal.
Dentro del huésped, las bacterias se multiplican y liberan citotoxinas que dañan las células epiteliales intestinales y conducen a la mortalidad.
Transfiere los nematodos supervivientes a placas bacterianas frescas y cuenta diariamente el número de gusanos vivos, muertos e insensibles hasta que muera el último gusano.
Finalmente, genera una curva de supervivencia para evaluar la viabilidad del hospedador a lo largo del tiempo.
Primero, selecciona una sola colonia de cada una de las cuatro cepas de Aeromonas y cultivalas según el protocolo de texto. Luego, mide la absorbanciaOD 600 del caldo bacteriano y ajusta hasta que la absorbancia sea igual a 2,0.
A continuación, localiza y extiende 30 microlitros de caldo bacteriano de cada cepa en placas NGM.
Selecciona y transfiere aleatoriamente los gusanos L4 previamente preparados a las placas NGM con las cepas Aeromonas. Luego, incuba las placas a 20 grados Celsius hasta que el ensayo esté completo.
Cada día transfiero todos los gusanos vivos a una nueva placa NGM con bacterias. Cuenta el número de gusanos vivos, muertos y sensores cada día hasta que el último gusano esté muerto.