Modelado de la patogénesis de Aeromonas en C. elegans mediante un ensayo de supervivencia

Comienza con un cultivo de una cepa de Aeromonas , un patógeno bacteriano, cultivado en un medio rico en nutrientes.

Mide la densidad óptica del cultivo y ajusta la concentración bacteriana para asegurar una carga de infección constante.

Placar el cultivo sobre un medio de crecimiento de nematodos o agar NGM e incubar para formar una capa bacteriana uniforme.

Preparar larvas sincronizadas con el desarrollo de C. elegans , un nematodo bacteriórico mantenidas en un medio enriquecido.

Transfiere las larvas a la capa bacteriana e incuba para permitir la ingestión oral de Aeromonas y facilitar la colonización intestinal.

Dentro del huésped, las bacterias se multiplican y liberan citotoxinas que dañan las células epiteliales intestinales y conducen a la mortalidad.

Transfiere los nematodos supervivientes a placas bacterianas frescas y cuenta diariamente el número de gusanos vivos, muertos e insensibles hasta que muera el último gusano.

Finalmente, genera una curva de supervivencia para evaluar la viabilidad del hospedador a lo largo del tiempo.

Primero, selecciona una sola colonia de cada una de las cuatro cepas de Aeromonas y cultivalas según el protocolo de texto. Luego, mide la absorbancia_OD