JoVE Encyclopedia of Experiments
Microbiología
0 vistas • 2:11 min • February 26th, 2026
Toma dos platos que contienen matrices de alginato impresas en 3D, cada una encapsulando cepas bacterianas de control o de prueba.
Ambas cepas expresan constitutivamente una proteína fluorescente para su visualización. La cepa de prueba también contiene un gen inducible para producir fibras extracelulares proteicas llamadas fibras de curli.
Los patrones están impresos sobre un soporte sólido complementado con calcio y rhamnose.
Incubar para permitir que los iones de calcio entreticulen el alginato, formando un hidrogel.
En la cepa de prueba, la ramosa induce la producción de subunidades de curli, que se autoensamblan en la superficie celular formando fibras.
Utiliza un escáner fluorescente para obtener imágenes de los patrones.
Trata con una solución quelante de calcio e incuba con agitación para secuestrar iones de calcio, lo que interrumpe los enlaces de alginato y disuelve el hidrogel.
Descarta la solución y vuelve a imaginar los patrones.
El tratamiento provocó que el patrón de control se disolviera, mientras que el patrón de prueba permaneció intacto gracias a la red estabilizadora de fibras de rizos.
Incubar las muestras impresas a temperatura ambiente durante tres a seis días para permitir la producción de los componentes del biofilm, como las fibras de Curli.
Luego, coloca la placa en un escáner fluorescente e imagina las planchas.
Para disolver la matriz de alginato, añade 20 mililitros de una solución de citrato de sodio de 0,5 molares a pH 7 sobre el sustrato impreso, incuba la placa a temperatura ambiente durante dos horas mientras agita a 30 rpm.
Luego, descarta el líquido y vuelve a fotografiar las placas, para compararlas con las imágenes de las placas antes y después del tratamiento con citrato.