Realización de cromatografía de capa delgada para evaluar la degradación de exopolisacáridos bacterianos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:23 min. • March 31st, 2026
Empieza con sobrenadantes fermentados que contienen exopolisacáridos degradados y no degradados, o EPS.
Estos EPS se obtienen durante la fermentación, donde poblaciones bacterianas fecales distintas en cada sobrenadante actúan de forma diferente sobre el EPS.
Observa los sobrenadantes cerca de la base de una placa cromatografía de capa delgada prerecubierta con una fase polar estacionaria.
Seca la placa al aire y luego colócala en una cámara que contenga una fase móvil con polaridad menor que la fase estacionaria.
A medida que la fase móvil sube, los EPS migran según su polaridad y tamaño.
El EPS grande y no degradado interactúa fuertemente con la fase estacionaria y permanece cerca del origen.
Los fragmentos degradados más pequeños se unen débilmente y migran hacia arriba con la fase móvil.
Quita la placa y seca al aire.
Sumerge la placa en un reactivo que colorea los carbohidratos y que reacciona con el EPS.
Seca la placa al aire y luego caliéntala para deshidratar el EPS y formar bandas de colores.
Una sola banda cerca del origen confirma el EPS no degradado, mientras que varias bandas confirman la degradación del EPS por bacterias.
Carga 0,2 microlitros de los supernadantes fermentados so
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