Imagen en lapso de tiempo de la segregación cromosómica en bacterias marcadas con fluorescencia

Comienza con una base de agarosa rica en nutrientes sobre un marco metálico que contiene bacterias que expresan orígenes cromosómicos marcados con fluorescencia y microsferas fluorescentes.

La almohadilla de agarosa apoya la inserción y movilidad bacteriana, y las microesferas fluorescentes sirven como referencia para seguir la segregación cromosómica.

Añadir aceite de inmersión a la lente objetivo en la cámara de incubación precalentada de un microscopio de campo amplio invertido.

Coloca la muestra sobre la lente y luego enfoca en una región que contenga varias bacterias y al menos una microesfera fluorescente.

Inicia imágenes en lapso de tiempo y captura tanto imágenes de contraste de fase como de fluorescencia.

El origen de replicación marcado con fluorescencia aparece como un cúmulo brillante cerca de un extremo de la célula.

Durante la división, el origen se duplica; un cúmulo permanece en el extremo original mientras el otro cúmulo migra al extremo de la celda recién formada.

Este sistema permite el seguimiento de la segregación cromosómica a lo largo de múltiples divisiones y puede adaptarse para visualizar procesos dinámicos similares en otras bacterias, incluidas especies patógen