Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:34 min. • February 26th, 2026
Toma una ratona colonizada vaginalmente con Streptococcus del grupo B o GBS, un patógeno bacteriano oportunista del tracto vaginal.
Sujeta al ratón e introduce un hisopo humedecido con tampón en la luz vaginal.
Gira suavemente el hisopo mientras aplicas una ligera presión en la pared vaginal para desalojar las bacterias que quedan en la superficie.
Sumerge el hisopo en un tampón y agita para suspender las bacterias.
Diluir en serie la suspensión en el tampón y placarla sobre un agar diferencial cromogénico que contiene un sustrato vinculado a un cromógeno.
Incuba para permitir el crecimiento bacteriano.
Durante la incubación, el SGB expresa una enzima específica que hidroliza el sustrato cromogénico.
El cromógeno liberado sufre oxidación y dimerización espontáneas, formando un compuesto de color rosa o malva.
Esto da lugar a colonias de GBS rosas o malvas, visualmente distintas de otras colonias bacterianas.
Cuenta las colonias para cuantificar la carga de GBS y evaluar su persistencia en el modelo de ratón.
Justo antes de hacer el hisopo, prehumedece el algodón en PBS y sujeta a uno de los ratones como acabo de mostrar.
Introduce el hisopo 10 milímetros dentro del lumen vaginal y gírate suavemente cuatro veces en sentido horario y cuatro veces en sentido antihorario, mientras aplicas una ligera presión en la pared vaginal.
Coloca el hisopo en un tubo microcentrífuga de 1,5 mililitros que contiene 100 microlitros de PBS, y haz un vórtice en el tubo y el hisopo durante unos 15 segundos para liberar las bacterias de las fibras de algodón. Luego, diluir en serie cada muestra en PBS y colocar 20 microlitros de 1 a 10 a 10.000 diluciones en una placa de agar de medio diferencial, preparada según las instrucciones del fabricante, para incubación a 37 grados Celsius durante 24 horas. Las colonias de GBS pueden aparecer de color rosa brillante o malva.