Evaluación microscópica de la inhibición mediada por enzimas de la formación de biopelículas
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:47 min. • February 26th, 2026
Comienza con dos microplatos con fondo de cristal que contienen suspensiones de una bacteria formadora de biofilm.
El plato de tratamiento contiene una enzima activa que altera la señalización, mientras que el control incluye la enzima inactivada.
Cubre los platos e incuba para permitir la adhesión bacteriana a la superficie del microplato.
Lava para eliminar las células no adherentes, luego introduce un medio fresco que contenga las enzimas e incuba.
En el plato de control, las bacterias se comunican mediante moléculas de señalización y producen sustancias poliméricas extracelulares (EPS), formando un biofilm.
La enzima activa degrada las moléculas señalizantes, interrumpiendo su función y reduciendo la formación de biofilmes.
Repone con medio fresco e incuba aún más para reforzar los efectos disruptores de biofilm de la enzima.
Retira el medio, añade lectinas marcadas con fluorescencia e incuba para permitir la unión de la lectina al EPS.
Lava para eliminar cualquier lectina suelta.
Incuba con un fijador para preservar la arquitectura del biofilm y luego enjuaga el plato.
Adquiere imágenes de microscopía confocal para evaluar la supresión mediada por enzimas de la formación de biofilm.
Para
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