Detección de sacaribacterias en cultivo binario mediante reacción en cadena de la polimerasa
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:06 min. • February 26th, 2026
Comienza con un cultivo de Actinomyces infectado con Saccharibacterias.
Las sacaribacterias, una bacteria parásita ultrapequeña, y su hospedador forman un cultivo binario.
Añadir una cuota del cultivo infectado a un tubo PCR que contenga reactivos de amplificación con colorante de seguimiento de electroforesis y cebadores específicos para Saccharibacteria.
Coloca el tubo en un termociclador con condiciones de PCR establecidas.
Durante la desnaturalización inicial, el calor lisa Saccharibacteria, liberando ADN genómico. Los actinomices permanecen intactos debido a las paredes celulares rígidas, limitando la liberación del ADN del huésped.
El calor desnaturaliza entonces las cadenas de ADN de Saccharibacteria y activa la polimerasa Taq.
Durante el recocido, los cebadores se unen a secuencias complementarias en el genoma de Saccharibacteria.
En extensión, la polimerasa Taq añade dNTPs a los cebadores, sintetizando nuevas cadenas de ADN.
Carga el producto de PCR amplificado sobre un gel de agarosa preteñido con un tinte que se une a los fragmentos de ADN.
Haz electroforesis y visualiza el gel bajo luz ultravioleta.
Una banda amplicon-específica para Saccharibacteria confirma la interacción huésp
Vea la transcripción completa y acceda a miles de videos científicos