Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:54 min. • February 26th, 2026
Tomemos peces cebra salvajes anestesiados y peces cebra inmunodeprimidos que carecen de linfocitos.
Coloca cada lado ventral de cada pez hacia arriba en una ranura tallada en una esponja húmeda para mantener la viabilidad.
Inyectar Mycobacterium marinum en la cavidad abdominal para establecer una infección sistémica que modele la tuberculosis humana.
Después de la inyección, traslada los peces al agua dulce del acuario para su recuperación y vispóntalos.
En el pez salvaje, una respuesta inflamatoria forma un granuloma compuesto por bacterias, macrófagos infectados y linfocitos. El granuloma contiene las bacterias, impidiendo su propagación.
Los linfocitos secretan citocinas que refuerzan la función antimicrobiana de los macrófagos, permitiendo la eliminación bacteriana.
En los peces inmunodeprimidos, el granuloma carece de linfocitos. Como resultado, los macrófagos permanecen parcialmente activados, permitiendo que las bacterias sobrevivan, se repliquen y se propaguen, lo que provoca la mortalidad de los peces.
Genera un gráfico de supervivencia. La alta mortalidad en peces inmunodeprimidos pone de manifiesto el papel de los linfocitos en el control de la infección.
Primero, pipeta una gota de 5 microlitros de la solución bacteriana diluida sobre un trozo de película de parafina. Luego, tira la gota de una aguja de insulina calibre 30.
Utiliza un pez de cinco a ocho meses para este experimento, siendo uno un pez salvaje y el otro un pez mutante de trapo. Coloca estos peces con el lado ventral hacia arriba en las rendijas de un trozo de plástico espumado y húmedo. Inyecta la aguja de insulina entre las aletas pélvicas en un ángulo de 45 grados.
Mantén la aguja abierta hacia arriba para asegurarte de que toda la abertura esté dentro de la cavidad abdominal. Luego, inyecta lentamente la solución bacteriana. Después de esto, retira cuidadosamente la aguja y transfiere inmediatamente el pez a un acuario de recuperación lleno de agua fresca.
Tome muestras de la alícuota bacteriana utilizada cada 15 minutos en placas 7H10. Incubar estas muestras a 29 grados Celsius durante cinco días para verificar la dosis de infección. Revisa regularmente el bienestar de los peces, asegurándote de eutanasiar a cualquier pez con síntomas de infección incubándolos en agua con más del 0,02 % de éster etílico de ácido 3-aminobenzoico.