Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:18 min. • March 31st, 2026
Comienza con una placa de cultivo que contiene colonias aisladas de una bacteria del suelo.
Recoge e inocúla una colonia en un matraz de cultivo con descero que contenga un medio nutritivo.
Incuba la cultura con el sacudido.
El matraz con defletores tiene crestas internas que aumentan la turbulencia durante el agitación, mejorando la aireación.
Este proceso garantiza una distribución uniforme del oxígeno y previene la agrupación y sedimentación celular, permitiendo una dispersión uniforme de nutrientes.
Las bacterias proliferan rápidamente, formando una densa suspensión con células que presentan características fisiológicas uniformes.
A intervalos regulares, recoge una muestra en una cubeta.
Usando un espectrofotómetro, pasa la luz a través de la muestra. La cantidad de luz transmitida se mide para cuantificar el crecimiento bacteriano, conocido como densidad óptica o OD.
Selecciona cultivos bacterianos en la fase exponencial a estacionaria temprana, ya que las células en esta etapa son altamente activas metabólicamente y, por tanto, son más susceptibles a una infección eficiente por bacteriófagos.
Las células de artrobacter se cultivan a partir de colonias estradas sobre una placa de agar LB, incubadas a 30 grados Celsius durante dos o tres días.
Usa un lazo estéril para elegir una colonia y añádela a 50 mililitros de caldo en un matraz de cultivo con defletor. Incubar el matraz en una incubadora agitada a 225 rpm a 30 grados Celsius durante aproximadamente 24 horas para obtener células de fase exponencial o estacionaria temprana para experimentos de infección por fagos.
Monitoriza de cerca el estado del crecimiento bacteriano para evitar que las células pasen al estado medio o tardío de crecimiento estacionario. El ODideal 600 para aislamiento de fagos está entre 0,5 y 0,7.