Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:52 min. • March 31st, 2026
Empieza con un ratón anestesiado con la espalda expuesta, colocado sobre la tapa de una placa de Petri.
El ratón tiene una herida de quemadura infectada con bacterias bioluminiscentes y resistentes a los medicamentos.
Cubre los ojos del ratón con papel de aluminio para evitar la sobreexposición a la luz azul.
Coloca el ratón bajo un dispositivo LED azul a una distancia fija.
Irradia la herida a intensidad constante. Aumenta el tiempo de exposición para administrar dosis más altas.
La luz penetra el tejido de la herida y llega a las bacterias colonizadoras.
Dentro de estas bacterias, las moléculas fotosensibles absorben la luz azul y se fotoactivan, produciendo especies reactivas de oxígeno (ROS).
El ROS daña componentes bacterianos, incluidas las proteínas bioluminiscentes, provocando la muerte celular bacteriana con un daño mínimo al tejido circundante.
Tras cada exposición, realiza imágenes bioluminiscentes para monitorizar la viabilidad bacteriana alrededor de la herida.
A medida que aumenta la dosis, la señal disminuye correspondientemente.
Este descenso indica el efecto antibacteriano del estrés oxidativo inducido por la luz azul.
Tras anestesiar a los ratones, según el protocolo de texto, se dividen aleatoriamente los animales en un grupo tratado con luz azul antimicrobiana o con aBL y un grupo control sin tratar. Para el grupo tratado con aBL, utiliza papel de aluminio para cubrir los ojos de los ratones y evitar una sobreexposición a la luz. Coloca las quemaduras del ratón directamente debajo del LED con una tapa de una placa de Petri de 35 milímetros debajo del abdomen del ratón para mantener la espalda en posición horizontal.
Después, cambia el medidor de energía por un ratón en una placa de Petri cuadrada. Luego ajusta la altura del ratón a una posición en la que la distancia entre la apertura del LED y la superficie de la quemadura del ratón sea igual a la distancia entre la apertura del LED y el sensor de luz del medidor de energía. Irradia las quemaduras infectadas a una irradiancia de 100 milivatios por centímetro cuadrado.
Administrar aBL en alícuotas de 72 julios por centímetro cuadrado hasta alcanzar la dosis total de 360 julios por centímetro cuadrado. Después de cada dosis de luz, realiza imágenes bioluminiscentes de las quemaduras del ratón, como se ha demostrado anteriormente en este vídeo. Para el grupo control no tratado, realizar imágenes bioluminiscentes de las quemaduras del ratón usando los mismos intervalos de tiempo que se usan para el grupo tratado con aBL.