Establecimiento de biopelículas bacteriana-fúngica cruzadas para el estudio de la patogénesis oral

Comienza con cultivos de Streptococcus mutans, una bacteria patógena oral, y Candida albicans, un patógeno fúngico oportunista.

Transfiere las colonias aisladas a un medio rico en nutrientes e incuba durante la noche para asegurar un crecimiento activo.

Centrifuga para pelletar las células. Retirar el sobrenadante y volver a suspender las células en solución salina estéril hasta una concentración definida.

Toma una placa multipozo recubierta con solución de salival humana para imitar el entorno oral.

Añade C. albicans e incuba para permitir la fijación al recubrimiento salival. Lava con solución salina estéril para eliminar las células no adherentes.

Añade suero inactivado por calor e incuba para estimular el desarrollo hifal. Enjuaga el exceso de sérum.

Introduce S. mutans, luego un medio rico en sacarosa e incuba. S. mutans secreta glucosiltransferasa, que se une a C. albicans mannans.

Esta enzima cataliza la sacarosa en glucanos en la superficie fúngica, anclando bacterias a las hifas y promoviendo la proliferación y la formación de la matriz.

Este método produce biofilms inter-reino que modelan la sinergia microbiana en la patogénesis oral.

Cultivar S. mutans y C. albicans en placas de