Preparación de colonias de biofilm bacteriano para análisis morfológicos
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 3:54 min. • February 26th, 2026
Comienza con colonias de biofilm bacteriano cultivadas en una placa de agar nutritivo.
Estos biofilms consisten en una matriz extracelular hidrofóbica que protege a las bacterias encapsuladas de las respuestas inmunitarias del huésped.
Añade un fijador y gira suavemente la placa hasta que la biopelícula empiece a flotar.
Sella la placa e incuba con suaves agitaciones para preservar la estructura de la biopelícula.
Retira el fijador, añade un tampón e incuba para estabilizar la estructura del biofilm.
Usando una pipeta Pasteur, desconecta suavemente la colonia del agar.
Añade concentraciones crecientes de etanol para deshidratar las colonias bacterianas.
Transfiere una colonia flotante a un papel filtro empapado en etanol y secárala al aire en una cámara cerrada.
Montar colonias secas sobre un muñón y puente recubiertos con cinta de carbono con cinta de carbono para evitar la carga inducida por haz de electrones.
A continuación, recubre el biofilm con una capa metálica conductora para mejorar el contraste de imagen.
El biofilm está ahora listo para su análisis morfológico mediante microscopía electrónica.
Para comenzar la fijación de la muestra, primero se prepare suficiente solución fijadora
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