Imagen confocal de biofilmes bacterianos inducidos por filtrados de esputo en pacientes con fibrosis quística
Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:32 min. • February 26th, 2026
Incubar un tapa con cámara que contenga bacterias adheridas en un medio suplementado con filtrado de esputo derivado del paciente y solo en el medio.
El filtrado de esputo contiene componentes derivados del huésped que estimulan las vías de señalización bacteriana, desencadenando la producción de matrices y la formación de biopelículas.
Una vez formadas las biopelículas, se desecha el medio que contiene bacterias flotantes y componentes residuales derivados del huésped.
Lava con un amortiguador para eliminar bacterias que están sueltamente adheridas.
Añade una mezcla tintora que contenga tintes fluorescentes permeables e impermeables a membranas, e incuba en la oscuridad.
El tinte permeable a la membrana cruza membranas intactas, marcando tanto bacterias viables como no viables. En cambio, el tinte impermeable solo entra en las membranas dañadas, marcando selectivamente bacterias no viables.
Tras la incubación, retira la solución de tinción y lávala con el tampón para eliminar el exceso de tinte y reducir la fluorescencia de fondo.
Añade un nuevo medio y adquiere imágenes usando microscopía confocal.
Los biofilms cultivados con filtrado de esputo muestran un mayor grosor, lo que pone de ma
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