Preparación de muestras e imagen de bacterias marcadas con fluorescencia

Comienza con una corredera de vidrio grande con diapositivas de vidrio más pequeñas colocadas en cada borde en una doble capa.

Vierte agarosa fundida en el espacio y cúbrela con otro portaobjetos grande de cristal.

Enfría la instalación para solidificar la agarosa.

Quita las láminas de cristal y corta la agarosa en pequeñas almohadillas.

Coloca las almohadillas de agarosa dentro de un marco adhesivo unido a una corredera.

Tomemos un cultivo de bacterias patógenas, genéticamente modificadas para expresar un sistema de secreción marcado con fluorescencia esencial para la infección del huésped.

Utiliza una zona bacteriana densa y suélvala en agua.

Vórtice para dispersar las bacterias de forma uniforme.

Aplica la suspensión en la almohadilla de agarosa para inmovilizar las bacterias.

Sella con una funda para mantener la hidratación.

Bajo iluminación de campo claro, selecciona un campo de células para la imagen.

Optimiza los ajustes del microscopio para reducir el fotoblanqueo y aumentar la sensibilidad de la señal.

Cambia al canal de fluorescencia para detectar las bacterias marcadas con fluorescencia.

Empieza haciendo almohadillas de agarosa para imágenes de células vivas. Prepara unos 30 mililitr