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Microbiología
0 vistas • 2:27 min • March 31st, 2026
Comienza con un ratón pretratado con antibióticos para agotar la microbiota intestinal.
Sujeta suavemente al ratón en posición vertical para alargar el esófago.
A continuación, toma una aguja gavage oral conectada a una jeringuilla que contiene un inóculo de esporas derivadas de Clostridium difficile, un patógeno bacteriano anaeróbio.
Introduce la aguja de gavage por el lateral de la boca y avanza lentamente hacia el esófago.
Cuando la aguja alcance el esófago medio, administra lentamente el inóculo y retira la aguja con cuidado.
Las esporas administradas atraviesan el estómago hasta el intestino delgado, donde las sales biliares desencadenan la germinación en bacterias vegetativas C. difficile .
Estas bacterias migran al colon anaeróbico, donde el agotamiento de la microbiota competidora permite la adhesión a las superficies epiteliales, la proliferación y la formación de colonias.
Las bacterias colonizadas liberan toxinas que alteran las uniones epiteliales y dañan la barrera intestinal. Esta ruptura de la barrera favorece la translocación bacteriana en tejidos más profundos, estableciendo Clostridium difficile infection.
En una capucha de flujo laminar, toma un ratón sujeto e inmoviliza la cabeza sujetándole suavemente con la piel suelta del cuello y la espalda.
Usando el dedo índice y asegurándose de que el animal no vocalice ni muestre signos de malestar, inmoviliza aún más la cabeza del animal y alarga el esófago. Mantén al ratón en posición vertical y coloca suavemente la aguja de gavage en el lateral de la boca. Dirige la aguja de gavage a lo largo del paladar y avanza lentamente hacia el esófago.
Cuando la aguja esté aproximadamente a mitad de camino dentro del esófago, inyecta 25 microlitros de inóculo de esporas y luego retira suavemente la aguja. Devuelve al animal a su jaula y obsérvalo en busca de signos de tos o dificultad respiratoria que puedan indicar una administración accidental de tráqueas.