Imagen de alto rendimiento de la infección intracelular por Brucella abortus en células epiteliales del hospedador

Comienza con las células epiteliales en las que la expresión de la proteína adaptadora de interferón, un mediador clave de la inmunidad innata, se ha reducido, haciendo que las células sean más susceptibles a la infección por Brucella .

Sustituir el medio por un medio de infección que contenga Brucella abortus y un patógeno facultativo intracelular que expresa una proteína fluorescente verde, a la concentración deseada.

Centrifuga la placa para promover el contacto entre bacterias y células huésped, y luego incuba para permitir la internalización bacteriana.

Lava las células con un medio que contiene suero y trátalas con un antibiótico para eliminar bacterias extracelulares.

Incubar más para permitir que Brucella se multiplique intracelularmente.

Lava las células con tampón y fijalas con paraformaldehído para preservar las estructuras intracelulares.

Enjuaga el fijador en exceso. Luego, añade un tampón suplementado con detergente para permeabilizar las células.

Lava el detergente residual, luego añade DAPI para teñir los núcleos y realiza un lavado final.

Utilizando un microscopio automático, adquiere imágenes de alto rendimiento de la infección por Brucella en las células epiteliales del