Establecimiento de infección bacteriana en larvas de Drosophila

Toma una gota de un patógeno bacteriano en una película de parafina.

Coloca una larva de Drosophila en la gota bacteriana.

Bajo un estereomicroscopio, utiliza una aguja de tungsteno para pinchar la larva y perforar su cutícula, la capa protectora externa y la epidermis subyacente.

Esto permite la entrada bacteriana en la hemolinfa larval, el líquido circulatorio.

Transfiere las larvas infectadas a una placa de agar ranurada y rica en nutrientes que contiene pasta de levadura como fuente de alimento.

Las ranuras facilitan la migración larvaria y previenen la deshidratación.

Añade la suspensión bacteriana restante a la placa y sellarla con película de parafina.

Incuba la placa en una cámara húmeda para mantener la viabilidad larval.

Dentro de la hemolinfa larval, células inmunitarias llamadas hemocitos detectan las bacterias e inician la fagocitosis.

Mientras que algunas bacterias se eliminan tras la fusión fagosoma-lisosoma, otras sobreviven retrasando la fusión o resistiendo el estrés intracelular y se replican dentro de los hemocitos, lo que conduce a una infección intracelular sostenida.

Las Drosophila larvae infectadas están ya listas para estudios de interacción huésped-patógeno.

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