Enciclopedia de Experimentos de JoVE
Microbiología
0 visualizaciones • 2:29 min. • March 31st, 2026
Toma una gota de un patógeno bacteriano en una película de parafina.
Coloca una larva de Drosophila en la gota bacteriana.
Bajo un estereomicroscopio, utiliza una aguja de tungsteno para pinchar la larva y perforar su cutícula, la capa protectora externa y la epidermis subyacente.
Esto permite la entrada bacteriana en la hemolinfa larval, el líquido circulatorio.
Transfiere las larvas infectadas a una placa de agar ranurada y rica en nutrientes que contiene pasta de levadura como fuente de alimento.
Las ranuras facilitan la migración larvaria y previenen la deshidratación.
Añade la suspensión bacteriana restante a la placa y sellarla con película de parafina.
Incuba la placa en una cámara húmeda para mantener la viabilidad larval.
Dentro de la hemolinfa larval, células inmunitarias llamadas hemocitos detectan las bacterias e inician la fagocitosis.
Mientras que algunas bacterias se eliminan tras la fusión fagosoma-lisosoma, otras sobreviven retrasando la fusión o resistiendo el estrés intracelular y se replican dentro de los hemocitos, lo que conduce a una infección intracelular sostenida.
Las Drosophila larvae infectadas están ya listas para estudios de interacción huésped-patógeno.
Coloca la pasta de levadura sobre una placa de zumo de uva con agar. Haz un corte fino en el agar donde las larvas puedan migrar para evitar que se sequen.
Monta una aguja de tungsteno puntiaguda de 0,001 milímetros con pinzas de sujeción usando película de parafina. Pipetear 50 microlitros de C de alto título y expresación de mCherry. Burnetii sobre la película de parafina bajo el microscopio estereoscópico y coloca las larvas en el charco de bacterias. Pincha las larvas con una aguja de tungsteno.
Transfiere las larvas a una placa de agar. Transfiere el medio patógeno restante a la placa de agar y sella la placa con película de parafina. Mantén las larvas en la placa en aire húmedo hasta el tiempo deseado tras la infección. Deja la C. Los burnetii infectaron larvas en la placa durante 24 horas.